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BD Rhapsody 平台

产品介绍

基于微孔的单细胞分割系统,结合了可视化工作流程质量控制。使用简单的微孔板工作流程和多层条形码系统,并在单细胞工作流程的每个步骤实施质量控制措施,对成百上千个单细胞的多组学信息进行高通量捕获和分析。BD Rhapsody™单细胞分析系统包括BD Rhapsody™扫描仪和BD Rhapsody™ Express单细胞分析系统。对于使用单细胞工作流程的新手用户来说,如果质量控制起到重要作用,在制定单细胞方案,以及使用新细胞类型或复杂细胞系统时,我们推荐使用BD Rhapsody™单细胞分析系统。该系统可以在每个实验中实施质量控制,并具有故障排除功能,以及单细胞捕获优化功能,且无需测序。


技术流程

部分结果展示

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   Rhapsody 8 通道捕获率


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不同平台粒细胞检测结果的对比


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  低活率样本的检测结果


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 微量细胞样本检测结果

送样要求

一、
去除杂质:用生理盐水清洗干净样本表面的血渍,筋膜等杂质
二、
去除死组织:去除样本边缘-因高频电刀切割造成的焦黑组织
三、
避免消毒:避免用碘伏或其他类似试剂进行浸泡/擦拭消毒处理
四、
尽快处理:样本尽快置于冰上保存,尽快运输或后续酶解操作

常见问题

1、因为样本特殊性,我获取的样品活性在80%以下,还能做单细胞测序吗?

可以。BD Rhapsody采用微孔法自然沉降捕获原理,对细胞的损伤更小,可以高效捕获脆弱和低活性细胞。BD Rhapsody为样品活性>50%的样本提供机会,对细胞碎片等杂质有较高的容忍度。

2、我课题的样品类型是海洋生物细胞,需要维持在海水中,BD Rhapsody能够做单细胞测序吗?

可以。BD Rhapsody上机过程可以携带人工海水组分,维持细胞原始状态,在反转录前每一步都会清除上一步buffer,维持原本的反转录效果。


3、你们单个样品检测细胞数的范围是多少?

BD Rhapsody™每个通道可检测细胞量范围是100-60000个细胞。既可以高效捕获稀有细胞数样品,也可以在高上样量的前提下保持低双胞率,确保您获得足量的细胞数量。

4、混样的应用,对应的细胞类型是?

有针对细胞水平的混样产品,也有研发出的专门混细胞核样本的试剂盒。前者包含human total cell、mouse total cell、mouse immune cell试剂盒,后者理论上不限物种。如果有其他物种的细胞水平混样,BD提供Flex SMK,用户只需准备该物种普遍表达在细胞膜表面的PE流式抗体,即可通过Flex SMK实现混样。

5、混样的优势是什么

降低成本、降低批次效应、提升样本通量、真正剔除部分多细胞


6、你们HT Xpress的多细胞率是多少?

落孔10000个细胞时~2%,60000个细胞时~11%。

7、我做的是human样本,比较关注中性粒细胞、嗜酸/嗜碱性粒细胞,这类细胞非常脆弱,你们可以做吗?

中性粒细胞、嗜酸/嗜碱性粒细胞是目前很多单细胞测序平台很容易丢失的细胞类型,因为这类细胞非常脆弱,占比少,半衰期短。BD Rhapsody™基于微孔自然沉降原理对单细胞进行分离捕获,没有额外的剪切力、试剂的刺激,对细胞更温和、损伤更小,因而能够高效的捕获这类脆弱敏感细胞。我们以往有大量的文献、实验数据可以予以证明。


8、BD Rhapsody可以与流式细胞实验结合吗?

可以的。碧迪医疗有流式细胞仪、单细胞捕获仪,可提供一站式的完整解决方案。例如:通过流式分选目的细胞,上样到单细胞机器,经过单细胞测序分析后,可能发现新的marker,可以通过流式进行验证。此外,对于低占比目的细胞群,分选后的细胞数很少,而BD Rhapsody上样体积足够大,无需离心浓缩,避免细胞丢失;同时在AbSeq抗体标签克隆号与流式相同,也可以用流式与单细胞多组学相互验证,等等。


9、我希望检测gamma delta T细胞的VDJ克隆型,现在很少有单细胞平台可以实现,请问你们能实现吗?

可以实现,虽然这部分细胞类型占比很少,但是BD Rhapsody VDJ检测试剂盒放入了alpha/beta T和gamma/delta T的VDJ引物,所以都能检测到。


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